لینک دانلود و خرید پایین توضیحات
فرمت فایل word و قابل ویرایش و پرینت
تعداد صفحات: 21
مواد و روشها و انتخاب دام
1) آماده سازی تعداد 2000 اسلاید جهت تهیه گسترش خون از رگهای جداری و رگهای عمقی و بررسی ریزبینی
2) آماده سازی سوزنهای پونکسیون جهت تهیه بیوپسی از غدد لنفی سطحی
( بخصوص پیش کتفی) تهیه گسترش بمنظور بررسی ریزبینی
3) تهیه لوله های ونوجکت(Veno ject ) حدود 2000 عدد جهت گرفتن خون و تهیه سرم و نگهداری آنها در منهای بیست در جه تا موقع انجام تست های سرمی( تست الیزا)
4) تهیه آنتی ژن لیوفیلیزه وآنتی ژن سونیکه
1-4 روش تهیه آنتی ژن لیوفیلیزه جهت انجام تست تیلرین
سلولهای میلوئید آلوده به شیزونت تیلریاآنولاتا (Schizont Infected myeloid cells) رااز پاساژ های پائین سویه های جداشده تهیه نموده و سپس سلولهای تهیه شده را در دور rpm 1600با محلول PBS دوبار شستشو داده سپس برمبنای کنسانتره سلولی را تهیه نموده و در شیشه های مخصوص لیوفیلیزه 4 میلی لیتری و 8 میلی لیتری هر کدام یک میلی لینر تقسیم و سپس با دستگاه لیوفیلیزه آنها را لیوفیلیزه نموده و تا موقع مصرف در نگهداری می گردند. در موقع مصرف به هر شیشه یک میلی لیتر آب دوبار تقطیر شده استریل اضافه نموده و پس از تکان دادن بعنوان آنتی ژن از آن استفاده می شود .لازم به یادآوری است که میزان سلول در کنسانتره باید باندازه ای باشد که غلظت پروتئین مورد لزوم برای تزریق بر مبنای در نظر گرفته می شود.
2-4 روش تهیه آنتی ژن به روش سونیکاسیون جهت انجام تست تیلرین
کنسانتره سلولهای میلوئید آلوده به شیزونت تیلریاآنولاتا همانند روش لیوفیلیزه تهیه نموده و تعداد سلول را در هر میلی لیتر به میرسانیم و پس از دو بار شستشو با PBS در دور 1600 در دقیقه با دستگاه سونیکاتور به برای مدت 5 دقیقه سونیکه نموده و در g 10000 به مدت ده دقیقه سانتریفوژ شده و به مدت سه بار با PBS شستشو داده می شود.
و مایع روئی به عنوان آنتی ژن درنظر گرفته می شود سپس توتال پروتئین آنتی ژن تهیه شده بر مبنای بدست آورده و آن را تا موقع مصرف در چهار درجه سانتی گراد نگهداری مینمائیم.
انتخاب دام جهت بررسی های آزمایشگاهی
در طی سالهای 84-83 جمعاً چهار رأس گوساله هلندی بین 5-4 ماه از دامداریهایی که تیلریوز در سال های گذشته نداشته انتخاب شدند و در اصطبل فاقد کنه(Tick free stable ) نگهداری شدند. گوساله ها مدت یک ما ه مورد بررسی های ضروری قرار گرفتند از عدم آلودگی آنها اطمینان حاصل شد و سپس جهت بررسی طرح تداوم ایمنی مورد استفاده قرار گرفتند.
روش تهیه آنتی ژن تیلر یا آنولاتا به روش هموژنیزه با دستگاه (Homogenizer)
1) پاساژ سلول های میلوئید شیزونت دار تیلریاآنولاتا در 10 ساعت به حجم تقریبی هر کدام 150ml (Kachani1992 )
2) جمع آوری سلولها در شروع مرحله ایستا(Stationary )
3) سانتریفوژ نمودن و حذف محیط کشت توسط سه بار شستشو با PBS
4) ذوب و منجمدنمودن سلولها در و برای دوبار
5) هموژنیزه کردن سلولها د رسه سیکل 10 دقیقه در دور( 260rpm )
6) دوبار ذوب و انجماد نمودن مجدد
7) سانتریفوژ در دو نوبت در دور 2000g به مدت 30 دقیقه
8) استفاده از مایع روئی بعنوان آنتی ژن
9) پروتئین سنجی اندازه گیری پروتئین، تنظیم آنتی ژن بر مبنای غلظت توتال پروتئین
انتخاب دام جهت بررسی های صحرائی
د رتاریخ 31/6/83 و 7/7/83 طبق ضوابط ذیل جمعا 92 رأس از هفت گاوداری با نظر متخصص اپیدمیولوژیی انتخاب گردید. ضوابط در نظر گرفته شده جهت انتخاب دامهای تحت بررسی عبارت بودند از:
1) عاری بودن دامها از الودگی های تک یاخته ای
2) مناسب بودن وضع عمومی دامها با اشتهای خوب و عدم لاغری
3) عدم آلودگی به بیماری های باکتریائی ، ویروسی و قارچی
4) عدم آلودگی به انگلهای درونی
5) مایه کوبی مرتب بر علیه بیماریهای باکتریایی و ویروسی( شاربن، پاسترولوز، طاعون، تب برفکی و شاربن عالمتی. در اسفند ماه 1384 کلیه دامهای گروه اول واکسینه شده گروههای دوم و سوم واکسینه نشده اند.
لینک دانلود و خرید پایین توضیحات
دسته بندی : وورد
نوع فایل : .doc ( قابل ویرایش و آماده پرینت )
تعداد صفحه : 12 صفحه
قسمتی از متن .doc :
_ متولوژی های (روشها و اسلوب) پرورش
این یک روش ابتدایی است که می توان در هر نوع برنامه پرورش گیاهان مورد استفاده قرار داد. هنگامیکه یک گونه تجاری مورد استفاده یا ماده ای که در پرورش گیاهان مورد استفاده قرار می گیرد، از خارج یا داخل کشور معرفی می شود. می تواند مستقیما بعنوان یک نوع جدید مورد بهره برداری قرار گیرد اگر در سطح خوبی باشد یا می توان از آن در روشهای پیوند گیاهان استفاده نمود. و اگر بعنوان ماده متغیر و ناپایداری شناخته شود در آنصورت از آن برای رسیدن به نتیجه مطلوب استفاده می شود .
_ Selection methods (روشهای انتخابی) یا (گزینش روشها)
اولین و مهمترین وظیفه یک پرورش دهنده پیدا کردن مواد ژنتیکی قابل دسترس می باشد که بصورت محلی وجود دارد و گاهی رشد کرده اند در محیط نا مساعد ، اغلب بدون دخالت آگاهانه کشاورزان از قبیل انواع زمینهای کشاورزی با قدمت یا حتی موجودات ذره بینی خاکهای زراعتی محلی این امر بخوبی ثابت شده است. که این مواد قابلیت سازگاری با شرایط نامساعد را دارند و بعنوان حذف کننده گونه های نا مطلوب و در عین حال حفظ کننده و نگاهدارنده ویژگی هایی که موجودات ذره بینی خاکهای زراعتی را غنی می سازند ( شناخته شده اند)
گزینه ردیف های یکدست را می توان بعد از شناخت بیشتر ردیف های تک تخمکی عالی تر جهت تولید اولیه برای پرورش دهندگان، انجام داد.
_ Mass selection (گزینه انبوه سازی)
این روش می تواند با پرورش ساده یک نوع گیاهی و در آوردن گونه های نا مطلوب انجام شود . گیاهان مطلوب باقیمانده در زمان ، به صورت توده جمع آوری می شوند. برای گرفتن نتیجه بهتر می توان بر روی گیاهان برچسب های ساده ای نصب نمود تا در زمان برداشت کار بهتر انجام شود. تفاوت وجود بین دو روش در میزان کار و تلاشی است که صرف می شود. روش جدید استفاده از گزینه انبوه سازی است که خصوصیات گونه های رو حفظ می کند.
_ Pureline selection (گزینه ردیف یکدست، نژاد اصیل)
در این روش بهترین گیاهان برچسب زده شده، بصورت جدا برداشت می شود و بعنوان ردیف های یکجنس یا سریهای مجزا ارزیابی می شود تنها ردیف یکدست برتر بعنوان اصلاح یک نوع جمع آوری می شود. در صورتیکه ردیف یکدست بحد کافی از نوع متفاوت باشد می تواند یک نوع جدید را تولید نمایند.
_ گزینه نمونه های مختلف از طریق پیوند
پس از وضع لقاح جنس پیوندی، بحد کافی گونه مختلف تولید می شود بخاطر خود باروری های پی در پی جنسهای پیوندی ، کاشه روز افزون تغییرات را در میان گونه های داریم اما در عین حال شاهد افزایش تدریجی آنها نیز هستیم. این تغییر پذیری را میتوان بوسیله روشهای مختلف اداره نموده وکنترل کرد از جمله روشهای ساده مثل تکدانه ای و روش انباشتن برای تکنیک های پرکار و وقتگیری نظیر روش اشتقاقی ( ریشه ای)
_ روش اشتقاقی
این روش شامل ثبت ردیفی از یک نسل یا رشد گونه ها و یا ردیف های انتخاب شده در هر نسل میباشد. این ثبت به پرورش دهنده در تصمیم گیری که آیا یک ردیف بخصوص را انتخاب کند یا نه کمک می کند. اطلاعات مزبور شامل یادداشتهایی در مورد مقاومت معمول ، رسیدگی ، ایستادگی در برابر بیماری ها یاحشرات و کیفیت می باشد. این روش این شانس برای پرورش دهنده جهت نمونه گرفتن از خانواده نسلهای مختلف فراهم می کند. برای مثال اگر دو نسل شبیه بهم عمل کنند یکی را می توان حذف نمود در صورتیکه بر طبق آن ثبتی که در ابتدا انجام شد کاملا بهم وابسته باشند در نتیجه پرورش دهنده این امکان را می یابد تا نسل غیر وابسته را از همان آمیزش تشخیص دهد .
پرورش دهنده بایست ساختمان تغییرات گونه ها را بهنگام استفاده از این روش در نظر داشته باشد. متغیر ترین سطح آن در نسل اتفاق می افتد در نتیجه سطح تک تخمکی های غیر همجنس در زمان وضع لقاح به سرعت کاهش یافته و نسبت تک تخمکی های همجنس افزایش خواهد یافت . پس از آن گزینش ها در چند نسل اولیه ( و حتی ) بر اساس نقش گیاهان مجرد انجام خواهد شد . حال آنکه در نسل های بعدی ( و بعد از آن) این روند به سمت نقش خانواده و ردیف