روش تهیه و استفاده از محیط کشت

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 12

روش تهیه و استفاده از محیط کشت :

هنگام تهیه و استفاده از محیط کشت باید به نکات زیر توجه شود :

تمام محیط های کشت باید واجد مواد غذایی لازم برای میکرو گانیسم باشند .

رطوبت موجود در محیط های کشت در حد مفید و لازم برای میکرو گانیسم باشد .

PH محیط باید در حد معین باشد برای باکتریوژی PH=7.5 و برای کپکها PH=5.4 است .

مواد شیمیایی که به عنوان غذا برای میکرو گانیسم در نظر گرفته می شود .

چون بعضی از ترکیبات موجود در ترکیبات موجود محیط کشت اثر نامطلوب بر روی یکدیگر دارند ، بهتر است این مواد جداگانه تهیه گردند به عنوان ، هید راتهای کربن را جداگانه تهیه و در حین آزمایش با سایر مواد تشکیل دهنده محیط کشت مخلوط نمود .

اگر از محیط جامد (حاوی آگاز ) استفاده می کنید بهتر است از ذوب مجدد محیط کشت خودداری شود چرا که در مواردی از بین رفتن فاکتور های رشد می گردد .

تمام محیط های کشت باید نامگذاری شده ، تاریخ تهیه ، نوع میکروارگانیسم کشت داده شده ، نام شخص آزمایش کننده بر روی محیط کشت نوشته شود .

انواع محیط کشت : بر3نوع است :

1/liguid or Broth Media

2/Semi Solid Media

3/Solid Media

محیط های کشت مایع و نیمه جامد در لوله تهیه می شود ، محیط کشت جامد یا در لوله به صورت مورب یا در پلیت مورد استفاده قرار می گیرد . که از نظر مواد غذایی تشکیل دهندة محیط کشت گروههای مختلف محیط کشت موجود می باشد .

طرز تهیة محیط های کشت :

باید توجه داشت که هنگام تهیه محیط کشت باید به دستوری که از طرف کارخانة سازندة محیط کشت داده می شود دقت شود در مراحل توزین دقیق ، حل کردن ، استریل نمودن و تقسیم انجام می گردد . برای توزین کردن بهتر است از لیوانهای کاغذی یکبار مصرف و یا کاغذ آلومینیومی استفاده نمود ، همچنین برای حلد کردن محیط کشت باید از آب مقطر گرم و تازه استفاده نمود .

ابتدا آب مقطر مورد نیاز در یک استوانة مدرج با دقت اندازه گیری می کنیم ، نصف آب مقطر را در ارلن مایری که دو برابر حجم آب گنجایش دارد ریخته ، پودر خشک محیط کشت به تدریج به آب اضافه نموده ، سپس بقیة آب مقطر را هم می افزائیم در حالیکه پودر را با آب مخلوط می کنیم آب را با چرخاندن ارلن به هم زده .

استریل نمودن محیط کشت :

/1 استریل کردن توسط اتوکلاو : محیط کشت را به مدت 20-15 دقیقه در درجه حرارت /12 و فشار در داخل اتوکلاو قرار می گیرد .

/2 حرارت دادن نوبه ای یا تند الیزاسیون :ابتدا محیط کشت را تا c 100 به مدت 30 دقیقه حرارت داده ، سپس در دمای c 37 نگهداری نموده ، سه روز متوالی این کار راانجام داده در پایان این مدت محیط کشت عاری از میکرو گانیسم میگردد.

/3 حرارت دادن خشک : درجه حرارت 80-60 درجه سانتیگراد به مدت 60-30 دقیقه استفاده شده به مدت 7-4 روز متوالی این عمل را تکرار می کنیم ، برای استریل نمودن سرم در محیط کشت مخصوص های دیگر استفاده می گردد.

/4 استفاده از صافی های مخصوص : موادی که با حرارت خراب می شوند با ابن روش استریل می گردد مانند پلاسما ، اوره و بعضی قندها .

تقسیم کردن محیط های کشت :

برای این کار از دستگاه های اتوماتیکی استفاده می شود که برای جلوگیری ازآلودگی نکات زیررا باید رعایت کرد .

/1بعد از اتو کلاو درب را نباید یک مرتبه باز کرد ، باید صبر کرد تا فشار پایین بیاید وگر نه فشار باعث پرتاب شدن محیط کشت به بیرون می شود .

/2 روی میز کار باید استریل گردد.

/3 پلیت ها و لوله ها ی استریل به طور مرتب روی میز قرار دهید .

/4 یک شعله با شلینگ بلند در محل کارموجود باشد .

لام های رنگ آمیزی شماره را زیر میکرویسکپ مشاهده می کنیم شکل های زیر مشاده می کنیم .

شماره 3 : پانسمان

باکتری اپتونومایسس

Aptinomyes

شماره 18 : بخش اطفال هم سطح زمین

باکتری استفیل Stapl

شماره 7: بخش داخلی بالای زمین

رنگ آمیزی گرم نشان دهنده با سیلهای

گرم منفی پلئومورفیک است که بعضی ها کوتاه و خمیده

و بعضی ها به شکل مارپیچ دیده می شوند .

شماره 1: بخش جراحی بالای زمین

yeast مخمر

روش تهیه و استفاده از محیط کشت

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 12

روش تهیه و استفاده از محیط کشت :

هنگام تهیه و استفاده از محیط کشت باید به نکات زیر توجه شود :

تمام محیط های کشت باید واجد مواد غذایی لازم برای میکرو گانیسم باشند .

رطوبت موجود در محیط های کشت در حد مفید و لازم برای میکرو گانیسم باشد .

PH محیط باید در حد معین باشد برای باکتریوژی PH=7.5 و برای کپکها PH=5.4 است .

مواد شیمیایی که به عنوان غذا برای میکرو گانیسم در نظر گرفته می شود .

چون بعضی از ترکیبات موجود در ترکیبات موجود محیط کشت اثر نامطلوب بر روی یکدیگر دارند ، بهتر است این مواد جداگانه تهیه گردند به عنوان ، هید راتهای کربن را جداگانه تهیه و در حین آزمایش با سایر مواد تشکیل دهنده محیط کشت مخلوط نمود .

اگر از محیط جامد (حاوی آگاز ) استفاده می کنید بهتر است از ذوب مجدد محیط کشت خودداری شود چرا که در مواردی از بین رفتن فاکتور های رشد می گردد .

تمام محیط های کشت باید نامگذاری شده ، تاریخ تهیه ، نوع میکروارگانیسم کشت داده شده ، نام شخص آزمایش کننده بر روی محیط کشت نوشته شود .

انواع محیط کشت : بر3نوع است :

1/liguid or Broth Media

2/Semi Solid Media

3/Solid Media

محیط های کشت مایع و نیمه جامد در لوله تهیه می شود ، محیط کشت جامد یا در لوله به صورت مورب یا در پلیت مورد استفاده قرار می گیرد . که از نظر مواد غذایی تشکیل دهندة محیط کشت گروههای مختلف محیط کشت موجود می باشد .

طرز تهیة محیط های کشت :

باید توجه داشت که هنگام تهیه محیط کشت باید به دستوری که از طرف کارخانة سازندة محیط کشت داده می شود دقت شود در مراحل توزین دقیق ، حل کردن ، استریل نمودن و تقسیم انجام می گردد . برای توزین کردن بهتر است از لیوانهای کاغذی یکبار مصرف و یا کاغذ آلومینیومی استفاده نمود ، همچنین برای حلد کردن محیط کشت باید از آب مقطر گرم و تازه استفاده نمود .

ابتدا آب مقطر مورد نیاز در یک استوانة مدرج با دقت اندازه گیری می کنیم ، نصف آب مقطر را در ارلن مایری که دو برابر حجم آب گنجایش دارد ریخته ، پودر خشک محیط کشت به تدریج به آب اضافه نموده ، سپس بقیة آب مقطر را هم می افزائیم در حالیکه پودر را با آب مخلوط می کنیم آب را با چرخاندن ارلن به هم زده .

استریل نمودن محیط کشت :

/1 استریل کردن توسط اتوکلاو : محیط کشت را به مدت 20-15 دقیقه در درجه حرارت /12 و فشار در داخل اتوکلاو قرار می گیرد .

/2 حرارت دادن نوبه ای یا تند الیزاسیون :ابتدا محیط کشت را تا c 100 به مدت 30 دقیقه حرارت داده ، سپس در دمای c 37 نگهداری نموده ، سه روز متوالی این کار راانجام داده در پایان این مدت محیط کشت عاری از میکرو گانیسم میگردد.

/3 حرارت دادن خشک : درجه حرارت 80-60 درجه سانتیگراد به مدت 60-30 دقیقه استفاده شده به مدت 7-4 روز متوالی این عمل را تکرار می کنیم ، برای استریل نمودن سرم در محیط کشت مخصوص های دیگر استفاده می گردد.

/4 استفاده از صافی های مخصوص : موادی که با حرارت خراب می شوند با ابن روش استریل می گردد مانند پلاسما ، اوره و بعضی قندها .

تقسیم کردن محیط های کشت :

برای این کار از دستگاه های اتوماتیکی استفاده می شود که برای جلوگیری ازآلودگی نکات زیررا باید رعایت کرد .

/1بعد از اتو کلاو درب را نباید یک مرتبه باز کرد ، باید صبر کرد تا فشار پایین بیاید وگر نه فشار باعث پرتاب شدن محیط کشت به بیرون می شود .

/2 روی میز کار باید استریل گردد.

/3 پلیت ها و لوله ها ی استریل به طور مرتب روی میز قرار دهید .

/4 یک شعله با شلینگ بلند در محل کارموجود باشد .

لام های رنگ آمیزی شماره را زیر میکرویسکپ مشاهده می کنیم شکل های زیر مشاده می کنیم .

شماره 3 : پانسمان

باکتری اپتونومایسس

Aptinomyes

شماره 18 : بخش اطفال هم سطح زمین

باکتری استفیل Stapl

شماره 7: بخش داخلی بالای زمین

رنگ آمیزی گرم نشان دهنده با سیلهای

گرم منفی پلئومورفیک است که بعضی ها کوتاه و خمیده

و بعضی ها به شکل مارپیچ دیده می شوند .

شماره 1: بخش جراحی بالای زمین

yeast مخمر